分子植物育种
(
网络版
), 2010
年
,
第
8
卷
,
第
3
篇
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2010, Vol.8, No.3
http://mpb.
5th
.
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ophiapublishe
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m
共
7
页,第
5
页
稻根与根系土壤共同水浸提的抑草稻抑草性能的
简单、快速、直观的检测方法
,
对初步探明抑草稻抑
草途径,具有重要的理论和实践意义。
3
材料与方法
3.1
试验材料
选用父母本来源相同、农艺性状相近仅抑草功
能存在显著差异的水稻材料
6177 (
抑草功能强
)
、
6173 (
抑草功能强
)
、
6171 (
抑草功能弱
)
,和另一有
显著抑草功能的水稻材料
6180
作为试验材料,上
述材料
(
图
5;
表
1)
均由芜湖市瑞民农业科技有限公
司提供。
杂草种替代材料:
本实验根据曾大力等
(2003)
试验方法,采用莴笋
(
莴苣
)
种子
(
市售
)
代替杂草种作
为供试材料。
试验仪器:
STS-3
型脱色摇床
(
上海琪特分析仪
器有限公司
)
;
TGL-16G
台式离心机
(
上海安亭科学
仪器厂
)
;
IRX-258D
智能人工气候培养箱
(
杭州钱江
仪器设备有限公司
)
;
LRH-400-GS
人工气候箱
(
广东
省医疗器械厂
)
。
图
5
抑草功能强
6180
、
6173
与抑草功能弱材料
6171
抑草性能
的田间比较试验
Figure 5 Comparison of field selecting on rice material 6180,
6173 and 6171 with significant allelopathy
表
1
水稻材料
6177, 6171, 6173
和
6180
抑草性能
Table1 Rice material 6173, 6180, 6177and 6171 with different
allelopathy
供试材料
Materials
大田鉴定的抑草性能结果
The results of allelopathy of field selection
6173
抑草能力最强
The strongest
6180
抑草能力第二
The second strongest
6177
抑草能力第三
The third strongest
6171
抑草能力最弱
The weakest
3.2
水稻材料培养过程
选取供试水稻材料
6177
,
6171
,
6173
和
6180
各
100
粒,分别以蛭石土为培养基,用水浸透,置于
人工气候培养箱培养
(
温度
30
℃
,
湿度
75%)
。待长到
苗期
(2~3
叶
)
后,用于收集叶片提取液、根提取液、
根与根系土壤共同水浸液、非根系土壤水浸液。
3.3
不同水稻提取液的收集
叶片提取液的收集:取水稻根以上组织,称鲜
重约
2 g
放于冰箱(-
25
℃
)
中保存
48
小时,待叶子变
硬脆后研磨,按照
1:10
的比例加入加入蒸馏水,放
上摇床
(160 rpm) 10 min
,后
5000 rpm
离心,
10 min
,
取上清,即得
1:10
叶片提取液,然后再稀释成
1:20
,
1:30
比例的提取液。
根提取液的收集:取水稻根洗净后,称鲜重约
2 g
,剪碎后研磨,并按照
1:10
的比例加入蒸馏水,
放上摇床
(160 r/min)10min
,后
5000×g
离心,
10 min
,
取上清,即得根提取液。
根与根系土壤共同水浸液的收集:取土培水稻
根与根系土壤约
30 g
,放入培养瓶中,加入
100 mL
蒸馏水,置于人工气候培养箱
(30
℃
)
培养
72 h
后,
取
40 mL
水浸液,离心
5 000 rpm
,
10 min
,取上清,
即得根系土壤水浸液。
非根系土壤水浸液收集:除去水稻根与根系土
壤后,再取剩余的非根系土壤约
30 g
,放入培养瓶,
加入
100 mL
蒸馏水,放入人工气候培养箱
(30
℃
) 72 h
后,取
40 mL
水浸液,离心
5 000 rpm
,
10 min
,取
上清,即得土壤水浸液。
以上
4
种提取液获得后均放入
4
℃
冰箱中保存,
供生物测试用。
3.4
提取液的生物检测
每种材料的提取液分别取
6 mL
,放入装有滤纸
(1~2
层
)
的培养皿内,每皿放
50
粒莴笋种子,以蒸
馏水为对照。将培养皿放入人工气候培养箱
(
温度
20
℃
,
湿度
75%)
,每隔
24 h
记录萌发情况。
72 h
后,测量每皿
50
粒莴笋幼根长度,取平均值。试
验设
3
次重复。
3.5
数据处理
获 得 的 原 始 数 据 均 转 化 为 抑 制 指 数
IR